《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:曲一帆, 刘健如, 翟奕翔, 陆梅华, 任庆腾, 龙兰琴, 李玉保, 季相山, 滕建
单位:1.山东农业大学动物科技学院,泰安 2710182.聊城大学农业与生物学院,聊城 252059
摘要:目的 了解湖北仙桃市某水产养殖基地黄鳝爆发性死亡病因,以期为水产养殖中鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolae)的诊断和防控提供参考。 方法 对患病黄鳝进行病理切片观察,使用无菌接种环从患病黄鳝脾脏病灶处穿刺采集样本后平板划线接种BHI固体培养基,分离优势菌株,并对其进行形态学观察、16S rDNA序列分析、毒力基因检测和耐药性评估;进一步通过回归感染试验检测分离菌株致病性,并通过高通量测序分析黄鳝肠道菌群变化。 结果 患病黄鳝剖检可见其脾脏、肝脏和肾脏分布有大量白色结节,并伴有脾脏肿大。组织病理学观察显示,病变组织中可见界限清晰的卵圆形结节,以多个肉芽肿聚集形成的肉芽肿团为主;组织内弥漫性出血,有大量受损或死亡的组织细胞。从典型病变组织中分离获得1株优势菌株,其在BHI培养基上形成粗糙、干燥、褶皱状的白色菌落,镜检为分枝杆状、革兰阳性杆菌,将其命名为HBAT01。16S rDNA序列分析显示,分离菌株HBAT01与鰤诺卡氏菌序列相似性达99.2%,结合形态特征鉴定该分离菌为鰤诺卡氏菌。毒力基因检测显示,分离菌株携带fbpA、mce1a、pafA、nirD、narH等12个毒力基因。药敏试验表明,分离菌株对新霉素、四环素、多西环素、麦迪霉素及克拉霉素等表现敏感。分离菌株回归感染黄鳝后,1×105、1×108 CFU/mL感染组黄鳝死亡率均为100%,致病性较强。肠道菌群分析显示,在门水平上,分离菌感染组黄鳝肠道菌群中弯曲杆菌门(Campylobacterota)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidota)等相对丰度均显著高于对照组(P<0.05),而梭杆菌门(Fusobacteriota)和厚壁菌门_A(Firmicutes_A)相对丰度显著低于对照组(P<0.05);在属水平上,分离菌感染组黄鳝肠道优势菌为弧菌属(Vibrio)、黄杆菌属(Flavobacterium)和新立克次体属(Neorickettsia),对照组黄鳝肠道优势菌属包括鲸杆菌属(Cetobacterium)、梭菌属(Clostridium)、不动杆菌属(Acinetobacter)和尼亚美杆菌属(Niameybacter)。 结论 本研究从患病黄鳝病灶组织中分离得到1株鰤诺卡氏菌,其携带多种毒力基因,致病力较强,对四环素类药物表现敏感。本研究为水产养殖中黄鳝诺卡氏菌病的诊断和防控提供了重要参考。
关键词:黄鳝;鰤诺卡氏菌;肉芽肿;耐药性;肠道菌群
基金资助:山东省自然科学基金青年项目(ZR2024QC008);聊城大学博士科研启动基金(318052368)