《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:孟丽娜, 梁建忠, 卡楚拉, 石婧宇, 特日格勒, 欧云文, 李旭阳, 韩博栋, 刘芳, 格日勒图
单位:1.内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特 0100112.阿拉善右旗农业技术推广中心,阿拉善右旗 7373003.翁牛特旗农牧局动物疫病预防控制中心,翁牛特旗 0245004.内蒙古自治区农牧业科学院,呼和浩特 010020
摘要:目的 从双峰驼乳中分离鉴定具有潜在抑菌活性的乳酸菌,对其所产抑菌活性物质进行初步分析,并评估其对鼠伤寒沙门菌攻毒小鼠的保护作用。 方法 从内蒙古阿拉善地区采集20份双峰驼乳,采用平板划线法接种,挑取单菌落进行革兰染色镜检观察分离菌株形态,通过16S rRNA基因测序进行菌种鉴定,并测定菌株的生长曲线、产酸曲线、耐酸性和胆盐耐受性;以金黄色葡萄球菌ATCC 29740、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌K88为指示菌,评价分离株的抑菌活性,进一步分析其所产抑菌物质特性;将4周龄昆明小鼠随机分为3种不同乳酸菌单组、乳酸菌混合组、商品化益生菌组和空白对照组,乳酸菌单组和乳酸菌混合组小鼠每天灌胃0.1 mL相应活菌(1×109 CFU/mL),商品化益生菌组每天灌胃0.1 mL商品化益生菌,空白对照组小鼠每天灌胃0.1 mL PBS,连续灌胃28 d,试验第29天,采用1×109 CFU/mL鼠伤寒沙门菌攻毒各组小鼠,测定攻毒后21 d内小鼠每日体重和采食量,试验结束后剖检小鼠,肉眼观察小肠病变程度并绘制小鼠生存曲线,评估分离菌对鼠伤寒沙门菌攻毒小鼠的保护作用。 结果 从20份双峰驼乳中初步分离鉴定出3株边缘整齐、表面光滑的革兰阳性乳杆菌,根据16S rRNA分子鉴定结果,3株分离菌最终鉴定为为植物乳植杆菌、鼠李糖乳酪杆菌和敏捷乳杆菌,分别命名为NMG-LP、NMG-LR和NMG-LA,3株分离菌均可在强酸(pH 1.0)和高胆盐(0.3%)MRS培养基中生长。抑菌试验结果显示,与对照组相比,3株分离菌对不同指示菌均具有显著的抑菌能力(P0.05)。经排除过氧化氢干扰后,各分离菌仍具有显著的抑菌活性(P<0.05)。经蛋白酶K和胰蛋白酶处理后,各分离菌抑菌活性与对照组相比显著降低(P<0.05)。小鼠攻毒试验结果显示,分离株NMG-LP与NMG-LR混合组对鼠伤寒沙门菌抗菌作用最佳,小肠眼观病变程度更低,保护率达到100%。 结论 本试验从双峰驼乳中成功分离获得3株在体外具有显著抗菌活性的乳酸菌。小鼠鼠伤寒沙门菌攻毒试验结果表明,植物乳植杆菌NMG-LP与鼠李糖乳酪杆菌NMG-LR联合应用保护效果最佳,可为后续益生菌的开发利用研究提供数据支撑。
关键词:驼乳;乳酸菌;抑菌活性;小鼠
基金资助:阿拉善盟科技计划项目(AMKJ2023-03);阿拉善盟科技计划项目(AMKJ2024-04);鄂尔多斯市重点研发计划项目(YF20240011)