犊牛源乳杆菌的筛选、安全性和益生特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第7期北京时间：

作者：王奥云, 汪雪, 赵清梅, 李勇, 马云, 余永涛

单位：1.宁夏大学动物科技学院，银川 7500212.北方民族大学生物科学与工程学院，银川 7500213.宁夏大学生命科学学院，银川 750021

摘要：目的 从健康荷斯坦犊牛肠道中分离鉴定乳杆菌，系统评价其安全性和益生特性，筛选具有预防犊牛腹泻潜力的益生菌候选菌株。 方法 采集30日龄内健康犊牛直肠内容物，采用MRS培养基厌氧分离乳杆菌，通过形态学观察、生化鉴定和16S rRNA基因序列遗传进化分析进行菌种鉴定；对分离株进行tetM、aac（6'）-aph（2''）等耐药基因和EfaAfs、ccf等毒力基因PCR检测，通过溶血试验及小鼠致病性试验评估分离菌安全性；对安全性良好菌株开展耐酸、耐胆盐、耐人工胃肠液、体外抑菌试验及Caco-2细胞黏附试验，评价其益生特性。 结果 从健康荷斯坦犊牛肠内容物中分离到单个、短链或栅栏排列的，无芽孢、无鞭毛、无荚膜的革兰阳性细长杆菌71株，均能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和蔗糖，触酶、硝酸盐还原试验均为阴性，经16S rRNA基因序列分析鉴定分属于副干酪乳酪杆菌、罗伊氏粘液乳杆菌、类布氏乳杆菌、动物联合乳杆菌、黏膜粘液乳杆菌、短促生乳杆菌和嗜酸乳杆菌7个种。其中副干酪乳酪杆菌为优势种（占比76.06%）。13株菌（18.3%）未检出耐药基因，其中短促生乳杆菌MH3111和类布氏乳杆菌MH3211未检出毒力基因，无溶血活性，小鼠试验未见毒性效应。益生特性检测结果显示，短促生乳杆菌MH3111和类布氏乳杆菌MH3211在pH 5.0~6.0生长良好，耐受pH 4.0；短促生乳杆菌MH3111胆盐耐受性突出（0.1%胆盐4 h存活率216.25%），胃肠液存活率高（胃液20.10%，肠液90.01%）；类布氏乳杆菌MH3211 对大肠埃希菌抑菌圈直径为14.33 mm，抑制效果显著；2株菌细胞黏附性均显著优于对照菌株干酪乳酪杆菌ATCC 393（P<0.05）。 结论 犊牛源乳杆菌MH3111和MH3211具备优良安全性和益生特性，MH3111以胃肠耐受性见长，MH3211抑菌效果突出，二者可作为犊牛特异性益生菌候选株，为替代抗生素防控腹泻提供菌株资源和理论依据。

关键词：犊牛;乳杆菌;安全性;益生特性

基金资助：宁夏回族自治区重点研发计划项目(2024BBF02018);宁夏回族自治区重点研发计划项目(2025BBF02007);国家自然科学基金项目(32472871)