番茄根际土尚未培养细菌的分离培养方法探究

来源：中国土壤与肥料杂志2023年第8期北京时间：

作者：吴晨晨，李怡君，徐双，马荣，韦善君，张晓霞

单位：(1.中央民族大学生命与环境科学学院，北京 100081;2.中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/农业农村部农业微生物资源收集与保藏重点实验室，北京 100081)

摘要：为探究获得土壤中尚未培养细菌资源的方法，以MS无机盐为基础养分，设置1/100×TSB、1/50×R2A和土壤浸提液(SE)3种低有机营养类型，凝固剂用琼脂(A)或结冷胶(G)，得到一组培养基MS+TSG、MS+TSA、MS+R2A和MS+SE，以及在此基础上添加1.5 g/L丙酮酸钠作为抗氧化剂的第二组培养基。用上述8种培养基分离培养健康番茄根际土壤中的细菌，并对各种培养基平板上代表性菌落进行16S rRNA基因分析。结果表明，在MS无机盐和低有机营养组合的培养基平板上，在28℃下培养28 d后可检测到菌落数达1×107 CFU/g土，4种培养基平板上检测到的菌落数量由多到少顺序为MS+SE>MS+TSG>MS+R2A>MS+TSA；在相同的低有机营养条件下，用结冷胶作为凝固剂可获得更多菌落，添加丙酮酸钠为抗氧化剂会显著降低菌落的多样性。鉴定的84个代表性菌落属于34个属的52个种，其中7个(占检测菌株数的8.33%)为可能新种，不同培养基上种丰富度表现为MS+TSA>MS+R2A>MS+TSG>MS+SE。结果说明，采用低有机营养的MS无机盐培养基有利于分离获得土壤中的一些尚未培养细菌。

关键词：尚未培养微生物;分离培养;番茄;根际土壤

基金资助：基金项目:国家重点研发计划(2019YFD1002000)；中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ZDRW202201)；北京市乡村振兴科技项目(BJXCZX2022)；中央民族大学大学生创新训练计划项目(URTP2021110091)。