施氏假单胞菌NRCB010的高密度发酵条件优化

来源：中国土壤与肥料杂志2023年第11期北京时间：

作者：李珊珊，郑东辉，刘柠，陶文轩，张欢欢，高南

单位：(1.南京工业大学生物与制药工程学院，江苏 南京 211816;2.南京工业大学2011学院，江苏 南京 211816;3.南京工业大学海外教育学院，江苏 南京 211816)

摘要：植物根际促生菌是最常用的微生物肥料的菌种来源。施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)因良好的促进作物生长、提高作物抗逆性及降解有机污染物等特性备受关注。以具有减少农田土壤氧化亚氮排放和良好促生特性的施氏假单胞菌NRCB010为研究对象，明确其菌落形态及生理生化特征；以生物量(以OD600值表示)为评价指标，通过单因素优选法确定发酵基础培养基和碳氮源及其浓度，通过正交试验设计和极差分析优化无机盐成分，通过响应面分析法优化发酵培养基配方。结果表明，NRCB010菌落呈圆形、皱褶状、黄色，革兰氏染色阴性，菌体短杆状、长度约2 μm、无芽孢；利用多种碳源、氨基酸和羧酸，具有还原力。改良的金氏B(King′s B)培养基为NRCB010发酵较好的基础培养基；以15 g/L糖蜜+葡萄糖(1∶1，W/W)为碳源、以25 g/L牛肉浸粉为氮源时NRCB010的生物量最高。最优无机盐组合为KH2PO4 1.5 g/L、 MgSO4·7H2O 1.5 g/L和NaCl 2.0 g/L。优化后的最优发酵培养基为糖蜜7.1 g/L、葡萄糖8.5 g/L、牛肉浸粉22.9 g/L、MgSO4·7H2O 1.3 g/L、NaCl 2.0 g/L和KH2PO4 1.0 g/L。使用此优化培养基发酵36 h，NRCB010发酵液的OD600值为11.09，有效活菌数为2.87×1010 cfu/mL。

关键词：植物根际促生菌;响应面分析法;发酵;假单胞菌

基金资助：基金项目:国家自然科学基金面上项目(项目编号:31972503)；南京工业大学大学生创新创业训练计划(项目编号:202242031)。