Cry3a杀虫蛋白基因的合成优化及在JK-SH007中高效表达

来源：中国生物工程杂志2017年第6期北京时间：

作者：李阳, 吴酬飞, 吴小芹, 叶建仁, 张立钦

单位：1. 南京林业大学林学院 南京 210037;2. 湖州师范学院 湖州 313000

摘要：人工合成优化 Cry3a 杀虫蛋白基因，并从大肠杆菌BL21（DE3）中克隆T7表达系统，通过同源重组克隆进PHKT2表达载体，将此表达载体导入吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007，通过诱导表达，成功指导合成T7 RNA聚合酶且高效表达分子量为70kDa的 Cry3a 蛋白。通过粗提液对二龄榆蓝叶甲进行生物毒杀试验，结果表明粗提液具有高毒性，致死中浓度（LC50=0.63（0.48-0.82） g/L）。成功构建的T7表达系统，可高效表达毒性的 Cry3Aa 蛋白，为进一步开发杀虫生防菌剂，建立外源基因表达技术平台奠定了基础。

关键词：苏云金芽孢杆菌,Cry3a基因,吡咯伯克霍尔德氏菌,杀虫活性,表达

基金资助：国家社科基金（16@ZH005）、国家自然科学基金（31550004）资助项目