利用异源正调控基因acyB2构建埃莎霉素I高产菌株

来源：中国生物工程杂志2017年第3期北京时间：

作者：戴剑漉, 卢智黎, 林灵, 王以光, 赫卫清

单位：1. 中国医学科学院/北京协和医学院 医药生物技术研究所 国家卫计委抗生素生物工程重点实验室 北京 100050;2. 东北农业大学生命科学学院 哈尔滨 150030

摘要：必特螺旋霉素（bitespiramycin，BT）是以异戊酰螺旋霉素（简称为埃莎霉素）Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ为主要成分的多组分抗生素。通过阻断3-O-酰基转移酶基因（sspA），获得了只产埃莎霉素Ⅰ的WSJ-2菌株，但其发酵产物中含有大量螺旋霉素，而埃莎霉素Ⅰ含量较低。为提高4″-异戊酰基转移酶基因（ist）在WSJ-2中的表达水平，从而提高埃莎霉素Ⅰ的产量，首先构建了含有ist基因和其正调控基因acyB2连锁片段的重组质粒pSET152-ia，然后将其导入到埃莎霉素Ⅰ产生菌WSJ-2中，通过具有阿普拉霉素（apramycin）抗性标记的链霉菌整合型载体pSET152整合到WSJ-2的染色体上，获得新的埃莎霉素Ⅰ产生菌WSJ-IA。在不同发酵时间定量检测ist的表达水平，WSJ-IA中ist的表达量要明显高于WSJ-2。WSJ-IA高产菌株的发酵单位从（280±20）μg/ml提高至（1160 ±108）μg/ml，较原始菌株WSJ-2提高了314%，而且在WSJ-IA发酵产物中埃莎霉素Ⅰ与螺旋霉素Ⅰ含量的比值是WSJ-2的2.4倍左右，说明在引入acyB2基因的同时提高了菌株的发酵单位和埃莎霉素Ⅰ的产量。

关键词：埃莎霉素Ⅰ,4″-异戊酰基转移酶基因(ist),正调控基因acyB2

基金资助：国家自然科学基金（81172972），国家科技重大专项（2014ZX09201003-002）资助项目