miR-145通过下调PLCε抑制膀胱癌EMT和迁移及其机制研究

来源：中国生物工程杂志2017年第3期北京时间：

作者：赵燕, 郝燕妮, 刘南京, 李婷, 吴小候, 罗春丽

单位：1. 重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆市重点实验室 重庆 400016);2. 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科 重庆 400016

摘要：目的：探讨miR-145调控PLCε对膀胱癌细胞T24上皮间质转化（EMT）和迁移的影响及可能的分子机制。方法：①腺病毒感染T24细胞，划痕实验和Transwell检测细胞的迁移能力；RT-PCR、Western blot分别检测PLCε及EMT相关分子的表达；为探究其分子机制，Western blot检测GSK-3β磷酸化（Ser9位点）和Snail的表达情况。②利用生物信息学技术预测可能调控PLCε的miRNA，结合文献报道的膀胱癌microRNA表达谱结果筛选出miR-145；转染miR-145 mimics至T24，qPCR检测miR-145、PLCε的表达，Western blot检测PLCε的表达。③转染miR-145 mimics，Western blot检测EMT相关分子及p-GSK-3β、Snail；划痕实验、Transwell检测过表达miR-145后细胞的迁移能力。结果：①干扰PLCε表达能显著抑制细胞的迁移，同时，使T24细胞中E-cadherin表达上调，N-cadherin和Vimentin表达下调；干扰PLCε后，GSK-3β磷酸化（Ser9位点）水平下降，Snail表达降低。②转染miR-145 mimics可使T24细胞中miR-145表达增高，且明显抑制T24细胞中PLCε的表达。③在T24中过表达miR-145，细胞迁移能力显著下降，EMT标志分子的表达情况与沉默PLCε结果一致。同时，与阴性对照组相比，转染miR-145 mimics组p-GSK-3β和Snail表达显著减少。结论：PLCε通过GSK-3β/Snail信号通路促进膀胱癌细胞T24发生EMT及迁移，miR-145可以逆转PLCε诱导膀胱癌EMT的发生，从而阻止膀胱癌细胞的迁移。

关键词：PLCε,miR-145,膀胱癌,上皮间质转化,迁移

基金资助：国家自然科学基金资助项目（81072086）