GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究

来源：中国生物工程杂志2017年第3期北京时间：

作者：盛彬, 杨帆, 孙心旖, 陈瑶, 李莉, 杨建一, 杜圣家, 刘铭

单位：1. 山西医科大学基础医学院 太原 030001;2. 北京协和医学院研究生院 北京 100005

摘要：目的：构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株，检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达，为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法：构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A，人胚肾293T细胞包被病毒并感染LncapC4-2细胞株，Puromycin筛选获得稳定过表达GPRC6A的细胞株。RT-PCR和Western blot验证细胞GPRC6A的过表达情况。划痕和transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，qPCR检测EMT相关基因表达。结果：成功构建GPRC6A表达的慢病毒载体，RT-PCR和Western blot检测LncapC4-2 GPRC6A过表达细胞株中GPRC6A的mRNA和蛋白质表达增高，与对照相比较，在过表达GPRC6A的LncapC4-2细胞中，细胞迁移和侵袭能力增强，并且EMT相关基因E-cadherin表达降低而SNAIL表达增高。结论：成功构建过表达的GPRC6A的前列腺癌细胞株，肿瘤细胞中的GPRC6A可能通过增强细胞迁移和侵袭能力并促进细胞EMT而参与前列腺癌发生发展过程。

关键词：GPRC6A,前列腺癌,上皮间质转化

基金资助：国家青年科学基金（81302220），山西省青年科学基金（2014021037-1），山西医科大学博士启动基金（B03201204）资助项目