新型菜豆环氧化物水解酶的异源表达及对映归一性催化特性

来源：中国生物工程杂志2016年第10期北京时间：

作者：叶慧华, 胡蝶, 李闯, 程建青, 邓超, 邬敏辰

单位：1 江南大学药学院 无锡 214122;2 生物工程学院 无锡 214122;3 无锡医学院 无锡 214122

摘要：为挖掘新型环氧化物水解酶（EH），探讨其对映归一性催化特性，以菜豆（Phaseolus vulgaris）总RNA为模板，采用RT-PCR扩增了一种菜豆EH（PvEH1）的编码基因pveh1，并将其在大肠杆菌BL21（DE3）中进行了表达。一级和三维结构分析表明，PvEH1与绿豆和苜蓿EHs的同源性分别为85.7和81.1%，其催化三联体为Asp-His-Asp，属于α/β水解酶超家族。当PvEH1催化外消旋环氧苯乙烷水解的转化率达99.1%时，产物（R）-苯乙二醇的对映体纯度为33.6% e.e.p。PvEH1对（S）-和（R）-SO的区域选择性系数αS和βR分别为91.1和53.3%。PvEH1的挖掘及其对映归一性催化特性的分析不仅增加了此类植物EHs的数目，而且为其归一性催化机制的研究和区域选择性的改造奠定了基础。

关键词：菜豆,环氧化物水解酶,表达,对映归一性

基金资助：江苏省研究生科研创新计划资助项目（KYLX15-1151；KYLX15-1190）