透明颤菌vgb基因在脱氮假单胞菌中的表达及对维生素B12合成的碳中心代谢流分析

来源：中国生物工程杂志2016年第9期北京时间：

作者：施慧琳, 王泽建, 吴杰群, 郭美锦, 储炬, 庄英萍

单位：1 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 国家生化工程技术研究中心 上海生物制造产业技术研究院 上海 200237;2 中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心 湖州 333000

摘要：在为维生素B12生产菌株脱氮假单胞菌确立合适的接合转移操作条件的基础上，通过单交换的方式，将vgb基因整合到脱氮假单胞菌染色体上，获得了vgb重组菌株Pvgb-16，并通过C同位素标记实验，探索VHb蛋白对脱氮假单胞菌碳中心代谢流变化和维生素B12合成的影响。研究结果表明，在相同的供氧条件下，vgb重组菌株Pvgb-16拥有更高的比生长速率和比产物合成速率，与出发菌株相比分别提升了22%和52%。碳代谢通量分布分析表明，vgb重组菌株Pvgb-16的PP途径改善，提升了NADPH合成通量；甘氨酸由甜菜碱合成的通量上升，促进了前体物质氨基乙酰丙酸的合成，进一步加速维生素B12的合成。总体来看，含vgb基因的重组菌株与出发菌株相比在促进菌体的生长、维生素B12的合成速率及得率上都有显著效果，对进一步的发酵生产应用研究具有重要意义。

关键词：脱氮假单胞菌,维生素B12,碳中心代谢流分析,vgb基因

基金资助：国家“863”计划资助项目（2015AA021005）