中间锦鸡儿CiCHIL克隆及其黄酮代谢功能研究

来源：中国生物工程杂志2016年第9期北京时间：

作者：韩晗, 包旦奇, 杨飞芸, 刘坤, 杨天瑞, 杨杞, 李国婧, 王瑞刚

单位：内蒙古农业大学生命科学学院 呼和浩特 010018

摘要：植物的次生代谢产物能够为植物的果实和花着色、有助于种子的形成、花粉的传播、适应外界逆境及防御害虫的攻击。苯丙烷代谢途径是植物中一个重要的次生代谢途径，苯丙烷代谢通路上有几条主要的分支，分支下游产生了上千种化合物。查耳酮异构酶（chalcone isomerase，CHI）是苯丙烷通路上的一个关键酶，催化查耳酮到黄烷酮的反应，主要作用是帮助底物进行正确的分子内环化反应，生成的黄烷酮类化合物成为苯丙烷代谢途径下游产物的底物。从中间锦鸡儿干旱胁迫抑制性削减杂交文库中克隆得到一个CHI基因家族成员，序列分析和系统进化分析表明，该基因属于CHIL基因亚家族成员，命名为CiCHIL。实时荧光定量PCR检测发现，该基因受UV-B诱导且过表达CiCHIL具有较强的抵御紫外胁迫的能力。对过表达株系进行RNA和蛋白质水平的检测，对挑选出来的过表达株系进行总黄酮含量检测，发现过表达株系总黄酮含量显著高于野生型。

关键词：查耳酮异构酶,Western blot,总黄酮含量,紫外胁迫,中间锦鸡儿

基金资助：国家自然科学基金（31360169），内蒙古产业创新创业人才团队、内蒙古自治区科技创新团队（201503004）资助项目