基于分子结构评价的Bacillus subtilis β-1,4-内切木聚糖酶胰蛋白酶抗性的理性设计

来源：中国生物工程杂志2016年第8期北京时间：

作者：虞晓丹, 吴秀秀, 姚冬生, 刘大岭, 谢春芳

单位：1. 暨南大学生物医药研究院 广州 510632;2. 暨南大学微生物技术研究所 广州 510632;3. 暨南大学生物工程系 广州 510632

摘要：饲料用酶在饲喂过程中，不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响，因此，饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168 β-1，4-内切木聚糖酶（XynA）的胰蛋白酶抗性进行理性设计，最终得到三个突变体——XynA、XynA和XynA。酶学性质分析显示XynA和XynA与野生型（XynA）的最适反应温度均为60℃，XynA为40℃；突变体酶与野生型酶的最适pH都是6.0；人工肠液（pH 6.8，10 mg/ml胰蛋白酶溶液）处理野生型及其突变体后，XynA和XynA的残留酶活力均明显比野生型高，它们的半衰期分别是野生型的2.02倍和1.52倍，XynA在胰蛋白酶溶液中的半衰期为90min，比野生型缩短了37 min。

关键词：理性设计,木聚糖酶,胰蛋白酶抗性,酶稳定性

基金资助：国家高技术研究发展计划（863计划）（2013AA102801），广东省省级科技计划项目（2013B090600141）资助项目