VEGFⅡ/GRP融合蛋白的构建、表达、纯化及其抗小鼠RM-1前列腺癌的作用研究

来源：中国生物工程杂志2016年第8期北京时间：

作者：曹荣月, 俞敏霞, 张昕黎, 李曼曼, 苗梓韬, 金亮

单位：中国药科大学生命科学与技术学院 南京 210009

摘要：设计并构建一种含VEGF和GRP抗原表位的表达载体pET28a-VEGFI-M2-GRP质粒，将其转化至大肠杆菌中，并对重组菌进行乳糖诱导表达，超声破碎，包涵体经洗涤、溶解、透析复性、离子交换层析等方法进行分离纯化后得到目的蛋白VEGFⅡ/GRP，Western blot 鉴定。建立前列腺癌RM-1细胞的C57BL/6J小鼠皮下移植瘤模型，以VEGFⅡ/GRP作为疫苗进行免疫。观察荷瘤小鼠的肿瘤生长情况计算抑瘤率，比较各组血管生成数以及ELISA检测抗VEGF抗体浓度，并研究该蛋白疫苗的抗肿瘤生长作用和抗血管生成作用。结果显示：ELISA结果表明小鼠血清中抗VEGF抗体比NS组高（P<0.05），重组蛋白VG组与NS组相比抗血管作用显著（P<0.05）。初步显示构建的重组蛋白有抑制肿瘤血管生长的作用。

关键词：VEGF,GRP,融合蛋白,前列腺癌,抗血管生成

基金资助：国家自然科学基金（81172973、81373232）、国家级大学生创新创业训练计划项目（J1030830，G14025）、江苏省高校优势学科建设工程（PAPD）、江苏省杰出人才引导项目（BK20140029）资助项目