一种遗传转化方法在海洋红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)中的应用

来源：中国生物工程杂志2016年第6期北京时间：

作者：孙文怡, 张素芳, 林心萍, 栾雨时

单位：1. 大连理工大学生命科学与技术学院 大连 116024;2. 中国科学院大连化学物理研究所 大连 116023;3. 大连工业大学食品学院 大连 116034;4. 吉林师范大学生命科学学院 四平 136000

摘要：海洋红酵母作为一种产油微生物富含油脂和类胡萝卜素,但由于没有合适的遗传操作方法,无法对细胞反应器进行理性改进,阻碍了它的进一步发展。首先利用农杆菌介导转化成功构建了海洋红酵母的遗传操作平台。参考完成基因注释的圆红冬孢酵母基因组信息,分离其甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子,以基于圆红冬孢酵母密码子优化的潮霉素作为筛选标记,构建载体转化至农杆菌AGL1中,利用农杆菌介导转化成功得到潮霉素抗性表型正确的转化子,通过表型验证,基因型验证以及Western blot在蛋白水平验证,鉴定了hyg基因的有效表达,证明了外源抗性基因成功导入海洋红酵母菌株中,实现了海洋红酵母新的转化方法的建立。

关键词：海洋红酵母,农杆菌介导转化,潮霉素

基金资助：国家自然科学基金面上项目(31370128)资助项目