中间锦鸡儿DHN1基因克隆及表达分析

来源：中国生物工程杂志2016年第4期北京时间：

作者：万永青, 杨洋, 张春林, 万东莉, 杨爱琴, 杨杞, 王瑞刚, 李国婧

单位：1. 内蒙古农业大学生命科学学院 呼和浩特 010018;2. 中国农业科学院草原研究所 呼和浩特 010010;3. 内蒙古伊金霍洛旗经济作物工作站 鄂尔多斯 017200

摘要：脱水素(DHNs, dehydrins)是LEA II亚家族蛋白,在种子发育后期大量积累,并受不同逆境胁迫处理诱导表达。在中间锦鸡儿干旱胁迫抑制性削减杂交文库中筛选到了一段 DHN1 序列,利用RACE技术克隆获得基因全长序列。序列比对分析表明, CiDHN1 具有开放阅读框891bp,起始密码子为ATG,终止密码子为TAG,编码297个氨基酸,含有5个Y片段和一个K片段,与CiDHN1相似性最高的为山茱萸科主教红端木(Cornus sericea),相似性为39%。系统进化分析显示CiDHN1单独聚为一支,推测该蛋白为新的功能未知蛋白。亚细胞定位结果表明CiDHN1定位在细胞质、质膜和细胞核。荧光定量PCR结果显示 CiDHN1 的表达受冷、脱水和NaCl等非生物胁迫的诱导。 CiDHN1 过量表达拟南芥后,其中表达量最强的株系对200 mmol/L的NaCl处理较为敏感。CiDHN1在中间锦鸡儿抵抗逆境胁迫中的功能有待于进一步研究。

关键词：DHN,基因克隆,表达分析,亚细胞定位,中间锦鸡儿

基金资助：国家自然科学基金(31360169)、内蒙古自然科学基金(2013MS0308)、内蒙古自治区科技创新人才团队、产业创新人才团队项目资助项目