四种类型启动子控制下空肠弯曲杆菌血红蛋白对大肠杆菌生长速度的影响

来源：中国生物工程杂志2016年第2期北京时间：

作者：许力, 熊炜, 杨江科

单位：武汉轻工大学生物与制药工程学院 武汉 430023

摘要：细菌血红蛋白可增加细胞在低氧条件下的氧气利用率,提高细胞的增长速率。为提高E. coli在现有发酵水平下的生物量,获得新型的基因工程底盘细胞,基于空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)血红蛋白基因,比较分析了组成型和诱导型启动子对血红蛋白在E. coli基因工程菌中的表达状况及对E. coli生长的影响。首先合成了空肠弯曲杆菌血红蛋白基因chb,并让chb基因在诱导型启动子(PT7和Pvgh)和组成型启动子(P2和PspoI-Ⅱ)控制下表达;随后,测定了由四种类型启动子控制的血红蛋白工程菌在摇瓶和蓝盖瓶中的生长状况。结果表明四种重组菌可以表达出有活性的血红蛋白,并可显著提高大肠杆菌的生长;在发酵罐中的试验也表明四种工程菌同样对细胞生长具有出促进作用;进一步比较分析了菌体密度、细胞鲜重和CO差式光谱值间的相互关系,讨论了四种类型启动子控制的基因工程菌在诱导表达和生长调控等方面的特点,并为在微氧和好氧等不同发酵条件下选用基因工程底盘细胞提供了参考。

关键词：空肠弯曲杆菌,血红蛋白,生长能力,启动子,CO差式光谱

基金资助：湖北省支撑计划项目(2014BBB007)资助项目