生物转化法制备L-天冬酰胺

来源：中国生物工程杂志2016年第1期北京时间：

作者：张奇, 张露, 徐友强, 裴疆森, 程池

单位：1. 中国食品发酵工业研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心 北京 100015;2. 山东省富马酸生物转化工程技术研究中心 烟台 265709

摘要：探索生物转化法制备L-天冬酰胺的技术与工艺。通过分子生物学方法,克隆来源于大肠杆菌(Escherichia coli, E.coli)JM109的天冬酰胺合成酶A基因asnA,并于E. coli BL21(DE3)中表达,利用构建的E.coli基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-asnA全细胞高密度催化L-天冬氨酸生产L-天冬酰胺,以PITC柱前衍生-高效液相检测底物和产物。表达的蛋白质分子质量约为37kDa,与预期大小相符,比酶活力为1786.6U/g。L-天冬氨酸转化率为95.8%,L-天冬酰胺产量可达126.5g/L,生产速率为15.81g/(L·h)。结果表明,已成功构建高效表达天冬酰胺合成酶A基因工程菌株,并用于催化L-天冬氨酸转化生产L-天冬酰胺,解决了L-天冬酰胺生物转化生产工艺中ATP成本过高的难题,为L-天冬酰胺制备提供新的绿色途径。

关键词：生物转化,L-天冬氨酸,天冬酰胺合成酶,L-天冬酰胺

基金资助：烟台市科技发展计划资助项目(2014SF151)