基于p62/SQSTM1-luciferase的细胞自噬水平检测方法的建立及鉴定

来源：中国生物工程杂志2016年第1期北京时间：

作者：赵远波, 洪杜北琦, 陈英玉

单位：1. 贵州医科大学生物与工程学院 贵阳 550025;2. 北京大学基础医学院 北京 100191;3. 北京大学人类疾病基因研究中心 北京 100191

摘要：自噬是细胞依赖溶酶体对大批量蛋白质和细胞器进行降解的一条重要途径。目前已发现很多基因和自噬过程相关,但是对自噬过程的分子机制尚未明了,因此建立自噬检测方法进行新的自噬相关分子的鉴定显得尤为重要。构建了选择性自噬底物p62/SQSTM1(Sequestosome 1)和萤火虫荧光素酶报告基因融合表达的重组质粒,通过检测细胞内荧光素酶的活性来分析细胞自噬流,建立了一个简单且适用于通量化筛选的细胞自噬检测方法,为进一步的高通量自噬分子的筛选奠定了基础。

关键词：自噬,SQSTM1,荧光素酶,p62

基金资助：国家973计划(2011CB910103),国家自然科学基金(31501118)资助项目