外源性S100A6蛋白对人结直肠癌细胞S100A6基因转录的影响及机制探讨

来源：中国生物工程杂志2016年第1期北京时间：

作者：孙晖, 李雪茹, 查何, 段亮, 袁世梅, 李欢, 李爱芳, 谷月, 周兰

单位：重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016

摘要：目的:探讨钙周期蛋白S100A6对人结直肠癌细胞系HCT116及SW480中 S100A6 基因转录的影响及机制。方法:首先采用原核表达方法制备重组人S100A6蛋白(recombinant human S100A6,rhS100A6) 并鉴定;rhS100A6蛋白(终浓度为10μg/ml)、重组腺病毒Adsiβ-catenin(可表达β-catenin的siRNA)处理结直肠癌细胞HCT116、SW480及正常肠上皮细胞FHC,采用半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription and polymerase chain reaction,RT-PCR)及定量实时聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)检测 S100A6 mRNA的水平,采用RT-PCR检测细胞中E-cadherin mRNA水平,采用Western blot检测并比较HCT116及SW480细胞核中β-catenin蛋白的水平变化,采用细胞免疫荧光法检测细胞中β-catenin分布的变化。 结果:成功制备rhS100A6蛋白;外源性rhS100A6蛋白上调HCT116及SW480细胞中 S100A6 mRNA水平和细胞核中的β-catenin蛋白水平并促进β-catenin发生核移位,同时下调细胞中E-cadherin mRNA水平;Adsiβ-catenin与rhS100A6联合处理组的 S100A6 mRNA水平明显低于单独rhS100A6处理组。所有差异均具有统计学意义。结论:胞外的S100A6蛋白增强结直肠癌细胞中 S100A6 基因的转录,其机制可能涉及β-catenin通路的激活。

关键词：结直肠癌,S100A6,β-catenin