登革病毒四型联合重组包膜蛋白III区的表达和免疫原性鉴定

来源：中国生物工程杂志2016年第1期北京时间：

作者：邱丽娟, 赵玉娇, 李多, 黄新伟, 王晓丹, 席珏敏, 潘玥, 陈俊英, 孙强明

单位：1. 北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所 昆明 650118;2. 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 昆明 650118

摘要：登革热在全球范围内广泛流行,但是目前为止却仍然没有疫苗上市,疫苗的开发迫在眉睫。抗体依赖增强感染效应是登革病毒疫苗开发中遇到的一个瓶颈问题。研究表明登革病毒的包膜蛋白III区能够介导中和抗体产生,且诱导产生较少的交叉抗体或无交叉抗体,能够大大减弱抗体依赖增强感染效应,因而是登革热重组蛋白疫苗的首选靶标。通过酵母密码子优化后合成同时包含4种血清型登革病毒包膜蛋白III区的四价联合DV EDIII蛋白序列,随后构建酵母表达质粒,并获得酵母表达菌株,经诱导后四联DV EDIII蛋白获得高效表达。通过Western blot、ELISA检测及蛋白质免疫原性鉴定,结果表明登革病毒四联DV EDIII蛋白表达质粒构建成功,重组蛋白在毕赤酵母获得高效表达,免疫小鼠后能够介导产生较高水平的血清效价。这表明已获得了能引起有效免疫反应的四型登革病毒EDIII蛋白,为登革病毒疫苗的研究提供了良好的基础。

关键词：登革病毒,包膜EDIII蛋白,疫苗,重组蛋白

基金资助：国家十二五重大新药创制科技重大专项 (2012ZX09104-302),国家自然科学基金面上项目( 81171946),云南省科技厅社会发展科技计划(2011CA016),云南省自然科学基金(2009ZC187M,2012FB188)资助项目