几种Protein A亲和层析填料纯化重组单克隆抗体效果的比较

来源：中国生物工程杂志2015年第12期北京时间：

作者：何凌冰, 李乐, 邓义熹, 蒙国基, 于玉根

单位：1. 深圳国家高技术产业创新中心 深圳 518057;2. 深圳万乐药业有限公司 深圳 518029

摘要：随着表达技术的进步以及发酵技术的优化,细胞发酵上清液中抗体的滴度大幅度提高,必然对下游纯化工艺的处理能力有更高的要求。Protein A亲和层析是分离单克隆抗体的一种标准纯化方法。目前已经有很多种protein A亲和填料,其配体基本上都是大肠杆菌发酵的重组protein A。不同厂家生产的protein A填料有各自不同的基质或键合技术,从而造成填料对抗体亲和力以及对碱耐受性的差异。针对正在研发的WLB303单克隆抗体,比较了6种不同的protein A填料的动态载量,并从洗脱溶液种类和pH两个方面进行单克隆抗体纯化条件的筛选,分析纯化后样品SEC纯度和回收率。综合考虑载量、除杂效果、回收率三个因素,MabSelect填料是最适合本抗体纯化的,SEC纯度可以达到98%,回收率可以达到100%左右。基于这些数据,对MabSelect填料进行了使用寿命试验,200次循环之后载量仅衰减了5%。

关键词：ProteinA,动态载量,SEC纯度,回收率