星形胶质细胞通过CX47促进少突胶质前体细胞增殖

来源：中国生物工程杂志2015年第12期北京时间：

作者：李真, 刘兆雨, 徐丹, 陈婷, 孟赞, 唐勇, 彭彦

单位：1. 重庆医科大学基础医学院 重庆 400016;2. 重庆医科大学第一附属医院 重庆 400016

摘要：目的:研究星形胶质细胞(AST)对少突胶质前体细胞(OPC)生长分化的影响及作用机制。方法:用P3SD乳鼠,建立星形胶质细胞与少突胶质前体细胞原代培养体系。实验分两部分,第一部分为常规OPC培养组、AST分泌因子组、AST与OPC直接接触式培养组;第二部分为AST与OPC直接接触式培养组、缝隙连接干扰对照组、缝隙连接干扰组。免疫荧光鉴定OPC与AST细胞纯度,光镜观察细胞生长状态,流式细胞术检测细胞周期,转录组测序分析不同状态下OPC中缝隙连接蛋白CX47差异表达,PCR和Western blot检测鉴定转录组测序CX47差异表达,EDU检测CX47干扰后OPC增殖能力,流式细胞术测干扰CX47后细胞周期变化。结果:光镜与流式检测发现,与AST接触培养的OPC增殖能力最强、新生细胞数目最多。转录组测序分析和PCR验证显示,AST接触调控OPC增殖的主要差异表达蛋白为CX47,干扰CX47后细胞周期阻滞在G1期,OPC增殖能力明显下降。结论; AST可通过缝隙连接蛋白CX47调控细胞周期,促进OPC增殖。

关键词：少突胶质前体细胞,缝隙连接,髓鞘再生,转录组测序

基金资助：国家自然科学基金(81470057)、重庆市首批百名学术科学领军人才培养计划资助项目