ste3与ste4基因双敲除对依博素生物合成的影响

来源：中国生物工程杂志2015年第11期北京时间：

作者：白利平, 姜蓉, 郭连宏, 张洋, 李元

单位：中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所 北京 100050

摘要：目的:以往研究已确定链霉菌胞外多糖依博素的生物合成基因簇(ste), 生物信息学分析基因簇中 ste3 和ste4 编码糖转运相关膜蛋白,现研究分析 ste3 和ste4 与依博素生物合成的相关性。方法:通过基因同源重组双交换获得 ste3 和ste4 双基因缺失突变株,经Southern 杂交验证后,对该菌株进行了基因互补研究。分离提取各菌株发酵液的胞外多糖,并计算产量。结果:双基因缺失株产生的胞外多糖依博素与野生株相比,产量从319mg/L降低至153mg/L,平均产量降低52%以上;基因互补后,依博素平均产量上升到299mg/L,基本恢复至野生株依博素产量水平。结论:本研究首次阐明了编码糖转运相关膜蛋白基因 ste3 和ste4 在依博素的生物合成中起重要作用,为研究链霉菌139的初级代谢和次级代谢之间的相关性奠定了基础。

关键词：链霉菌,基因双敲除,ste3 ste4,依博素

基金资助：国家自然科学基金(31070086),北京市自然科学基金(5092020),北京协和医学院协和青年科研基金(3332014009,3332015166),中央级公益性科研院所基本科研业务专项(IMBF2015011)资助项目