纳豆激酶基因的优化设计、合成及其在烟草叶片中的瞬时表达

来源：中国生物工程杂志2015年第9期北京时间：

作者：韩岚, 鞠林芳, 牛一丁, 王迎春, 哈斯阿古拉

单位：1 内蒙古大学生命科学学院 内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室 呼和浩特 010021;2 呼和浩特职业学院生物化学工程学院 呼和浩特 010051

摘要：根据植物偏爱密码子优化设计、合成纳豆激酶基因sNK,利用重叠延伸PCR 法在其中插入番茄果实特异性表达基因 E8 的第一内含子构成sNKi基因,通过农杆菌渗透法将这两种基因渗入到烟草NC89 叶片中并实现瞬时表达.通过RT-qPCR 法将两种基因在烟草叶片中转录水平的表达量进行比较,结果表明两种基因在烟草叶片中均表达,且sNKi基因的表达量显著高于sNK基因;通过纤维蛋白平板法在两种基因的瞬时表达样品中均能检测到纤溶酶活性,表明目的基因在烟草叶片中可正常翻译并表现出溶栓活性,且sNKi基因在翻译水平的表达量显著高于sNK基因.表明内含子对人工合成的纳豆激酶基因的瞬时表达具有显著的促进作用.

关键词：纳豆激酶,密码子优化,瞬时表达,内含子,烟草

基金资助：内蒙古自治区科技创新团队和内蒙古自治区高等学校创新团队发展计划资助项目(NMGIRT1401)