海底沉积物中几丁质酶的筛选、分离及活性分析

来源：中国生物工程杂志2015年第8期北京时间：

作者：张瑞祥, 杨忠

单位：华东理工大学生物工程学院 上海 200237

摘要：目的:从海底沉积物中筛选得到一株几丁质酶活性较高的菌株,分离纯化菌株分泌的几丁质酶,并对其活性进行酶学分析。方法:以中国南海北部湾的沉积物为样本,结合透明圈法及DNS法筛选菌株。采用几丁质结合能力分析及多种层析方法分离纯化菌株分泌的几丁质酶,对其中一种几丁质酶进行酶学性质分析。结果:共筛选获得21株几丁质酶产生菌,其中分泌的几丁质酶活性最高的为蜡样芽孢杆菌B04 (Bacillus cereus strain B04)。发现该菌共分泌6种含有几丁质结合域的蛋白。从蜡样芽孢杆菌B04发酵液中,分离纯化得到分子量为36 kDa的几丁质酶。研究发现,该酶是蜡样芽孢杆菌B04的一种主要的几丁质酶,其最适pH为4.0,最适反应温度为60℃,在pH 3.0~10.0范围内活性稳定,Co对其活力有明显促进作用,Ag有显著的抑制作用。结论:为几丁质酶的工业化应用提供了基础。

关键词：海底沉积物,蜡样芽孢杆菌属,几丁质酶

基金资助：通讯作者,