禾谷镰刀菌中FgPDE1基因的敲除及其功能的研究

来源：中国生物工程杂志2015年第8期北京时间：

作者：常玉梅, 侯占铭

单位：内蒙古师范大学生命科学与技术学院 呼和浩特 010020

摘要：目的:旨在敲除禾谷镰刀菌Fusarium graminearum FgPDE1基因,确定其缺失突变体表型,从而分析该基因的生物学功能。方法:应用Split-marker技术构建含有潮霉素基因敲除盒,通过PEG介导原生质体转化,PCR筛查抗潮霉素转化子以获得缺失突变体ΔFgPDE1,根据突变体表型变化及致病性的检测对FgPDE1基因的功能进行分析。结果:采用Split-marker技术,成功构建了FgPDE1基因敲除盒;PEG介导转化禾谷镰刀菌原生质体后成功获得转化子。经PCR筛查,得到3个PCR确认的敲除突变体;表型观察发现,ΔFgPDE1菌落的外型及菌落生长速度与野生型没有明显差异。孢子侵染西红柿果实实验证明:以西红柿为侵染宿主,相对于野生型,突变体致病性没有明显减弱;但突变体分生孢子产量显著下降。结论:FgPDE1基因可能与禾谷镰刀菌分生孢子的形成有关。

关键词：禾谷镰刀菌,FgPDE1,基因敲除,Split-Marker

基金资助：国家自然科学基金资助项目(31160280)