转基因水稻中HPT蛋白质的检测及表达特征研究

来源：中国生物工程杂志2015年第6期北京时间：

作者：杨烁, 郝育杰, 兰金苹, 韦汉福, 魏健, 荣瑞娟, 武鹏程, 刘国振, 尹长城, 李莉云

单位：1. 河北农业大学生命科学学院 保定 071001;2. 北京华大蛋白质研发中心有限公司 北京 101318

摘要：hpt是转基因植物中最常用的筛选标记基因之一,建立了HPT蛋白质免疫印迹检测技术、了解其在转基因植物中的表达特征具有重要的理论意义和应用价值。在大肠杆菌中进行了HPT蛋白质的重组表达,利用纯化的HPT蛋白质制备了其特异性的单克隆抗体,采用免疫印迹学方法对转基因水稻4021中HPT蛋白质的表达情况进行了检测,该方法可检测出单粒稻米的10%(约1.5mg)所含的HPT蛋白质。定量分析发现水稻苗期HPT蛋白质含量约占鲜重的0.01‰。对CaMV35S启动子驱动下的转基因水稻中HPT蛋白质的表达谱进行分析,发现其在苗期和成株期的叶片中表达量较高,在灌浆期的种子中呈现不断增加的趋势,而在茎、分蘖节、茎节、叶鞘、叶枕和根等组织中表达量较低。建立了完整的利用免疫印迹方法检测HPT蛋白质的技术,同时系统分析了HPT蛋白质在转基因水稻中的表达谱。

关键词：转基因水稻,HPT蛋白质,免疫印迹技术,筛选标记基因

基金资助：国家科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-006B)、北京市自然科学基金重点项目(5121001)资助项目