微流控芯片对乳腺癌细胞MDA-MB-231的捕获及再培养研究

来源：中国生物工程杂志2015年第6期北京时间：

作者：桑维维, 常亚男, 李娟

单位：1. 中国科学院高能物理研究所 北京 100049;2. 安徽大学生命科学学院 合肥 230601

摘要：目的:利用实验室构建的微流控芯片对乳腺癌细胞(MDA-MB-231)进行捕获,提高捕获率并保证细胞活性,实现再培养。抗肿瘤药物阿霉素处理正常培养和再培养的细胞,分析细胞内的基因表达变化。方法:对微流控芯片进行基底修饰, 利用MUC1抗原与抗体特异性结合捕获肿瘤细胞,优化捕获条件提高捕获率。对微流控芯片捕获的细胞进行分离、收集和再培养。用1μmol/L 阿霉素对正常培养和再培养的细胞分别孵育24h,然后提取RNA并逆转录合成cDNA。选择乳腺癌细胞中高表达及与肿瘤转移相关的基因 FN1、ITGA6和LAMB3 设计引物,以cDNA为模板分别进行RT-PCR扩增,对琼脂糖凝胶电泳结果进行灰度分析。结果: 经MUC1抗体修饰的微流控芯片能有效地捕获肿瘤细胞,捕获率达80%±3%,释放率约98%,细胞释放后存活率高实现再培养。阿霉素对正常培养和再培养的乳腺癌细胞中 FN1、ITGA6 和LAMB3 的基因表达均有抑制作用。结论: MUC1抗体修饰的微流控芯片能有效捕获乳腺癌细胞并实现再培养,捕获前后细胞内基因表达无显著差异,均能产生药物敏感性。

关键词：微流控芯片,捕获再培养,阿霉素,MDA-MB-231

基金资助：973国家重大科技计划项目(2015CB932104)、国家自然科学青年基金(11405185)资助项目