14-3-3γ蛋白协同mTOR信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能

来源：中国生物工程杂志2015年第6期北京时间：

作者：刘静, 骆超超, 黄建国, 吴迪, 高学军, 刘玉芬

单位：1. 哈尔滨师范大学生命科学与技术学院 哈尔滨 150080;2. 东北农业大学 农业生物功能基因重点实验室 哈尔滨 150030

摘要：14-3-3γ作为蛋白质与蛋白质之间的\"桥梁蛋白\",广泛参与细胞凋亡、细胞分裂、信号转导和蛋白质合成等生物体所有的重要生命活动的调节。以体外培养的荷斯坦奶牛(Vaccas)乳腺上皮细胞(dairy cow mammary gland epithelial cells, DCMECs)为模型,研究14-3-3γ对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂合成的影响。瞬时和稳定转染pGCMV/IRES/EGFP/14-3-3γ即14-3-3γ过表达的奶牛乳腺上皮细胞,应用CASY细胞活力分析仪分析细胞活力的变化,测定细胞中甘油三脂(triglyceride, TG)和β-酪蛋白(β-Casein,CSN2)的合成,并且通过Western blot检测DCMECs中mTOR(mammalian target of rapamycin, mTOR)和p-mTOR的表达量,探究14-3-3γ影响奶牛乳腺上皮细胞生理功能的机制。结果显示,瞬时和稳定转染pGCMV/IRES/EGFP/ 14-3-3γ 的奶牛乳腺上皮细胞相对正常培养的奶牛乳腺上皮细胞,细胞活力极显著增强(P<0.01),CSN2和TG表达量极显著增加(P<0.01),同时mTOR和p-mTOR的表达量也显著增加(P<0.01)。研究结果表明14-3-3γ参与泌乳关键信号通路即mTOR信号通路,能够增强乳腺上皮细胞活力,促进奶牛乳腺上皮细胞CSN2和TG的合成,丰富了奶牛泌乳信号通路,为乳品质研究提供了新的理论依据。

关键词：14-3-3γ,奶牛,乳腺上皮细胞,mTOR,信号通路

基金资助：国家973计划(2011CB100804)、国家863计划(2013AA102504-03)资助项目