《中国生物工程杂志》发表论文赏析
作者:黄健, 黄美容, 朱杰华, 骆诗露, 闵迅
单位:1. 遵义医学院附属医院检验科 遵义 563003;2. 遵义医学院附属医院输血科 遵义 563003
摘要:SP0306蛋白是肺炎链球菌TIGR4菌株中的一种假想的转录因子,但其蛋白三维结构及生物学功能尚未明了,生物信息学分析提示其可能调控碳水化合物代谢相关基因的表达。成功构建了SP0306蛋白的全长表达载体PET28a-sp0306,利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行原核表达,获得了以可溶形式表达的目的蛋白。经Ni-NTA柱亲和层析及DEAE阴性离子交换层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白。采用悬滴气相扩散法获得了质量较好的SP0306蛋白晶体,并初步进行了晶体X射线衍射,为其最终的三维结构解析及生物学功能研究奠定了基础。
关键词:肺炎链球菌,SP0306蛋白,原核表达,晶体生长
基金资助:国家自然科学基金(81460317)、贵州省社会发展公关计划(2012GZ83293)资助项目