基因差异转录表达验证方法研究进展

来源：中国生物工程杂志2015年第5期北京时间：

作者：左海洋, 陈晓丽, 蔡勇, 郝海生, 秦彤, 赵学明, 路永强, 王栋

单位：1. 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 130118;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室 北京 100193;3. 北京畜牧总站 北京 100107

摘要：基因的差异表达与组织、细胞的生物学性状和功能密切相关,随着对组织、器官分化及细胞、生物个体生长发育等的深入研究,大量差异转录基因的验证分析变得越来越重要。为此,该领域基于核酸互补配对和PCR原理建立了Northern blot和荧光定量PCR等一系列基因差异转录分析技术,利用这些方法对不同处理、不同组织器官、不同发育时段的基因差异转录进行了验证分析,为后续的基因功能分析奠定了坚实基础,并且通过检测分析,使基因差异表达分析方法由定性到定量、由繁琐复杂到简单快速、由以大量RNA为前提到对少量RNA样品的检测,甚至建立了单细胞荧光定量PCR方法,基因差异转录验证方法正在向更高效、精准方向发展,并使成本逐步降低。但是,到目前为止,生殖细胞等样品取样较为困难、精子等RNA含量较少样品的基因差异表达验证挑战性还仍然很大。从验证方法发展历程的角度,对基因差异转录验证方法进行了总结,希望为取样难度较大、RNA含量较低样品的基因差异表达分析提供有价值的参考。

关键词：基因差异表达,荧光定量PCR,核酸杂交,核酸探针

基金资助：国家自然科学基金(31372296),奶牛产业技术体系北京市创新新团队项目:中国农业科学院家畜胚胎工程与繁殖创新团队项目(ASTIP;cxgc-ias-06)资助项目