Ketogulonigenium vulgare四环素诱导表达穿梭质粒的构建

来源：中国生物工程杂志2015年第5期北京时间：

作者：罗婉月, 李天明, 于莹, 许湄雪, 仪宏

单位：河北科技大学 石家庄 050018

摘要：采用重叠延伸PCR方法合成阻遏蛋白的编码基因tetr和插入操纵基因teto的Ketogulonigenium vulgare山梨糖脱氢酶启动子psndhteto的基因序列,借助宽宿主质粒pBBR1MCS-5,构建四环素诱导表达的穿梭质粒,转化Ketogulonigenium vulgare,获得阳性重组菌株,实现卡那霉素抗性的调控表达,结果表明:培养重组菌株2小时后,添加0.4μg/ml的四环素诱导剂后,能够在含有卡那霉素的培养基中生长,不添加四环素诱导剂的重组菌株不能在含卡那霉素的培养基中生长,确定了最适四环素的诱导浓度为0.6μg/ml。

关键词：生酮古龙酸杆菌,基因合成,穿梭质粒,四环素诱导