过量表达钝齿棒杆菌柠檬酸合酶编码基因prpC2对L-精氨酸合成的影响

来源：中国生物工程杂志2015年第3期北京时间：

作者：房战, 徐美娟, 饶志明, 满在伟, 许正宏, 耿燕, 陆茂林

单位：1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122;2. 江南大学药学院 无锡 214122;3. 江苏省微生物研究所有限公司 无锡 214063

摘要：钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5是诱变选育的一株高产精氨酸菌株.柠檬酸合酶作为TCA途径的关键酶,对细胞胞内氨基酸代谢流调节有重要作用.在钝齿棒杆菌SYPA5-5中过量表达同源的柠檬酸合酶(citrate synthase)基因 prpC2 ,研究其对精氨酸及副产物合成的影响.重组菌C. crenatum SYPA5-5/pDXW-10-prpC2 胞内柠檬酸合酶比酶活提高了5.37倍,使L-精氨酸产量在5L发酵罐中达到44.7g/L,与对照相比提高了23.1%.同时,有机酸测定分析TCA循环的精氨酸前体柠檬酸及异柠檬酸的量有所提高,且赖氨酸合成前体草酰乙酸量减少,氨基酸测定分析L-精氨酸发酵中最主要的副产物L-赖氨酸浓度由原来的5.96g/L降到1.21g/L,降低了80%.

关键词：L-精氨酸,钝齿棒杆菌,柠檬酸合酶,发酵

基金资助：国家973计划(2012CB725202),国家863计划(2012AA022102),国家自然科学青年基金(31300028),教育部重点研究项目(113033A),江苏省青年自然科学基金(BK20130137),中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51306A)资助项目