具有增强蛋白质表达活性序列ER3的筛选及其功能区域的初步鉴定

来源：中国生物工程杂志2015年第3期北京时间：

作者：崔成成, 毕艳红, 王应明, 李攀, 杨思达, 黄芬, 曾韦锟, 井申荣

单位：昆明理工大学医学院 昆明 650500

摘要：目的:利用构建的增强子样序列筛选载体,筛选在大肠杆菌中增强外源蛋白质表达的序列,并利用删除突变体初步鉴定其功能区域.方法:以氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因序列与人乳头瘤病毒(HPV)主要衣壳蛋白基因 L1 的截短序列L11连接作为报告基因,从采集的样品中筛选增强子样序列,通过蛋白质表达来检测其增强活性,并通过构建删除突变体来初步鉴定其功能区域.结果: 成功筛选到一条增强子样序列,可使检测载体氯霉素抗体提高11倍,融合蛋白表达水平提高2.26倍,其功能区域主要集中在1~265bp.结论:从收集的样品中成功筛选出一个增强子序列,能提高外源基因在大肠杆菌中的表达.

关键词：增强子样序列,增强基因表达,删除突变体,功能区域

基金资助：国家自然科学基金(31360619,31160193),云南省应用基础研究面上项目(2010ZC055,2012FB135) 资助项目