高产雷帕霉素的游动放线菌菌种的选育

来源：中国生物工程杂志2015年第2期北京时间：

作者：石漫漫, 乔长晟, 朱明, 李雪, 刘姗姗

单位：1. 天津科技大学生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津 300457;2. 天津北洋百川生物技术有限公司 天津 300457

摘要：以游动放线菌(Actinoplanes)BCLP-016为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术对其孢子进行处理,并将三个不同时间处理的孢子悬液混合。稀释涂布后,根据菌株菌落形态挑取部分单菌落进行初筛,经发酵复筛后,筛选得到了一株雷帕霉素高产菌株ARTP-039,其雷帕霉素的产量可达到369.39mg/L,较出发菌株BCLP-016的产量256.86 mg/L,提高了43.81%。以筛选出的ARTP-039高产菌为出发菌株,进行传统的紫外诱变,选取高、中、低三个致死率相对应的时间对其孢子悬液进行处理,并基于核糖体工程的理论选取了链霉素、庆大霉素、利福平、氯霉素和红霉素五种抗性物质,进行抗性初筛。发酵复筛后,最终筛选得到了一株雷帕霉素高产菌株St+Gen+Rif+Chl+Er-015,该菌株同时具有五种抗性。该菌株的摇瓶实验结果表明,发酵7d后,其雷帕霉素的产量可达到589.79mg/L,较出发菌株BCLP-016的产量,提高了129.61%,且其遗传稳定性良好。

关键词：雷帕霉素,游动放线菌,常压室温等离子体诱变,紫外诱变,核糖体工程