海产品中霍乱弧菌免疫磁分离和环介导等温扩增快速检测方法的建立

来源：中国食品学报杂志2015年第2期北京时间：

作者：程晋霞; 曾静; 张西萌; 张蕾; 刘莉; 张海予

单位：程晋霞; 曾静; 张西萌; 张蕾; 刘莉; 张海予北京出入境检验检疫局;北京农学院;,

摘要：目的:采用纳米免疫磁珠分离霍乱弧菌,建立霍乱弧菌环介导等温扩增检测方法,以缩短检测时间。方法:采用本实验室制备的霍乱弧菌单克隆抗体制备纳米免疫磁珠,特异性吸附霍乱弧菌,结合环介导等温扩增技术,建立霍乱弧菌快速检测方法。结果:霍乱弧菌纳米免疫磁珠在菌体浓度103CFU/m L水平,对霍乱弧菌的捕获率最高达70%。免疫磁分离结合环介导等温扩增技术,在纯培养、无需增菌的情况下,检测灵敏度达到4.8×102CFU/m L菌液。通过测试102株霍乱弧菌和101株非目标菌,该检测方法均具有良好的特异性。在食品基质添加试验中,其检测限为1 CFU/25g样品,增菌时间缩短到8 h。结论:霍乱弧菌免疫纳米磁珠结合环介导等温扩增技术缩短了增菌时间。目标菌纯培养、无需增菌条件下,检测灵敏度达到4.8×102CFU/m L增菌液。人工添加样品,8 h增菌条件下,检测低限达到1 CFU/25 g样品。

关键词：免疫磁分离;霍乱弧菌;环介导等温扩增

基金资助：质检总局公益项目(201110034); 国家质检总局科技计划项目(2009IK184)