海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化重组大肠杆菌细胞

来源：中国食品学报杂志2015年第2期北京时间：

作者：孙丽慧; 沈爱萍; 何宝龙; 郑裕国

单位：孙丽慧; 沈爱萍; 何宝龙; 郑裕国浙江工业大学生物工程研究所;,

摘要：目的:研究产酸性磷酸酶的重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28b-AP/PT固定化制备条件以及固定化细胞的酶学特性。方法:比较9种细胞固定化方法,海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化为最佳方法;优化凝胶组成、菌体包埋量和固定化时间等条件,比较固定化细胞和游离细胞的酶学性质。结果:最适共固定化条件是:活性炭质量分数1.0%,海藻酸钠质量分数2.0%,聚乙烯醇质量分数6.0%,Ca Cl2质量分数2.0%,菌体包埋量6 g/100 m L凝胶溶液,固定化时间6 h。固定化细胞的酸性磷酸酶最适作用温度为35℃,比游离细胞提高5℃;固定化细胞与游离细胞的酸性磷酸酶最适作用p H均为5.0,固定化细胞显示出比游离细胞更宽泛的p H适应性。固定化细胞在重复使用12批后相对酶活力为54.5%,具有良好的操作稳定性。结论:海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化是非常适合固定化重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28b-AP/PT的方法。

关键词：固定化;重组大肠杆菌;酸性磷酸酶;5′-肌苷酸

基金资助：国家自然科学基金-青年基金项目(31101351)