聚乙烯醇和海藻酸钠固定化柚苷酶的制备及其性质

来源：中国食品学报杂志2015年第3期北京时间：

作者：肖安风; 游洪燕; 倪辉; 朱艳冰; 蔡慧农

单位：肖安风; 游洪燕; 倪辉; 朱艳冰; 蔡慧农集美大学生物工程学院;福建省食品微生物与酶工程重点实验室;福建省高校食品微生物与酶工程技术研究中心;厦门市食品与生物工程技术研究中心;,

摘要：以聚乙烯醇、海藻酸钠为载体,固定化柚苷酶;以戊二醛为交联剂,考察固定化工艺条件对酶活的影响,研究固定化酶的部分酶学性质。用高效液相色谱法分析柚苷酶的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力,结果表明:最佳载体组合为11%聚乙烯醇与0.5%海藻酸钠;当缓冲液p H 4、戊二醛含量1%、交联时间0.5 h、吸附时间3 h、加酶量141 U/m L、硼酸4%、Ca Cl21%时,固定化酶活力达到最大值。柚苷酶固定化后,α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶活力的最适温度提高5℃,最佳活性p H值提高1.0,p H稳定性基本不变,温度稳定性下降5℃。α-L-鼠李糖苷酶、柚苷酶的米氏常数(Km)固定化后都增大;α-L-鼠李糖苷酶的最大反应初速度(Vmax)经固定化后减小,柚苷酶的Vmax增大。将固定化柚苷酶重复使用7次后,它的α-L-鼠李糖苷酶和柚苷酶残余活力分别保持71%与80%。

关键词：聚乙烯醇;海藻酸钠;固定化;柚苷酶;α-鼠李糖苷酶

基金资助：国家自然科学基金项目(31271914); 福建省科技计划重点项目(2011N0101)