利用pGhost系统筛选抗后酸化保加利亚乳杆菌

来源：中国食品学报杂志2015年第4期北京时间：

作者：李晨; 赵云; 郭鑫; 卢海强; 田洪涛; 郭兴华; 罗云波

单位：李晨; 赵云; 郭鑫; 卢海强; 田洪涛; 郭兴华; 罗云波河北农业大学食品科技学院;河北省农产品加工工程技术研究中心;中国科学院微生物研究所;中国农业大学食品科学与营养工程学院;,

摘要：目的:利用p Ghost系统构建抗后酸化保加利亚乳杆菌。方法:利用载体p Ghost9:ISS1经复制型转座构建突变体,之后在p H 4.3条件下,突变细胞用含终质量浓度2 000μg/m L青霉素处理5 h。将处理后的菌液涂布在含终质量浓度2μg/m L红霉素的MRS平板上,长出的菌落分别点种p H 4.3和p H 6.5的MRS平板进行筛选,在低p H值条件下生长不良或不生长的菌株即目的菌株。经进一步检验,筛选发酵性能与出发菌株相当,而贮藏期后酸化能力大为减弱的菌株。将筛选出的抗后酸化菌株通过低温刺激,使转座后的载体重组,载体部分从染色体上切除,并经高温培养后丢失。剔除载体后的突变型菌落是食品级突变体,为红霉素敏感型。结果:获得3株抗后酸化保加利亚乳杆菌菌株,其生物学性状稳定,回复突变率低。

关键词：pGhost系统;抗后酸化;保加利亚乳杆菌;复制转座

基金资助：河北省高等学校科学技术研究项目(QN2014065); 国家自然科学基金项目(31301520)