基于TaqMan探针荧光定量PCR技术快速检测乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A

来源：中国食品学报杂志2015年第6期北京时间：

作者：刘继超; 姜铁民; 姜阿赤; 岳华; 李建涛; 王群; 陈历俊

单位：刘继超; 姜铁民; 姜阿赤; 岳华; 李建涛; 王群; 陈历俊北京三元食品股份有限公司;吉林农业大学;,

摘要：目的:建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的Taq Man探针实时荧光定量PCR方法。方法:对金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因序列分析、对比,设计特异性引物和Taq Man探针,建立对金黄色葡萄球菌肠毒素A的快速检测方法,并验证该方法的特异性、稳定性和灵敏性。结果:Taq Man探针荧光PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A具有极强特异性,标准曲线相关系数为0.998,最低可检测出71个拷贝数的细菌DNA,检测乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A菌灵敏度为1.3×102CFU/m L,不同浓度质粒重复性扩增试验Ct值的变异系数均<3%,显示了良好重复性。结论:Taq Man探针荧光定量PCR方法可以在6h内快速、准确地检出金黄色葡萄球菌肠毒素A,为金黄色葡萄球菌快速检测和食物中毒快速诊断提供技术支撑,推动了荧光PCR技术在食品安全检测方面的实践应用。

关键词：金黄色葡萄球菌;Taq Man探针;实时荧光定量PCR;SEA基因

基金资助：国家863计划(2012AA101605); 国家“十二五”支撑计划(2012BAD12B03)