产甘露聚糖酶海洋微生物的筛选及酶学性质研究

来源：中国食品学报杂志2015年第12期北京时间：

作者：李云程; 林娟; 梁燕辉; 叶秀云; 朱凡

单位：李云程; 林娟; 梁燕辉; 叶秀云; 朱凡福州大学生物科学与工程学院;福建省海洋酶工程重点实验室;,

摘要：目的:筛选产甘露聚糖酶的海洋微生物。方法:采用2216E、海水-高氏一号和海水-PDA培养基对采集的微生物进行分离纯化,采用平板透明圈法对菌株进行初筛,并对初筛中HC值较大的菌株通过发酵测酶活复筛;采用16S r DNA序列分析,并结合细胞和菌落形态观察及部分生理生化试验,对菌株进行鉴定;利用硫酸铵盐析法制备粗酶液,研究甘露聚糖酶作用的酶学特性。结果:从台湾海峡采集的海水和海泥样品中,分离得到细菌467株,霉菌145株,放线菌10株,初筛得到64株有透明圈的菌株,复筛得到菌株B555,其酶活力最高为28.18 U/m L,经鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.)。菌株B555所产甘露聚糖酶的最适反应p H为7.0,且在p H 5.0～10.0时较稳定;最适反应温度为50～55℃,在55℃时半衰期约为150 min;1 mmol/L的金属离子Ni+、Co2+、Zn2+、Mg2+、Ca2+、Na+、K+、Fe3+、Ba2对酶活力均有抑制作用。在55℃,p H 7.0条件下,该酶对槐豆胶和魔芋粉有很好的底物特异性,Km值分别为4.7和3.33 mg/m L,Vmax值分别为588.23和476.19μmol/(m L·min)。可应用于魔芋甘露低聚糖的酶法制备。

关键词：甘露聚糖酶;海洋微生物;筛选;鉴定;酶学性质

基金资助：国家海洋局海洋公益性行业科研专项(201305015); 国家科技部“863计划”课题(2013AA102101)