酿酒酵母工程菌生物合成白藜芦醇

来源：中国食品学报杂志2016年第3期北京时间：

作者：孙萍; 郭丽琼; 黄佳俊; 黄晓燕; 梁景龙; 林俊芳

单位：孙萍; 郭丽琼; 黄佳俊; 黄晓燕; 梁景龙; 林俊芳华南农业大学食品学院华南农业大学食品生物技术研究所;广东省微生态制剂工程技术研究中心;,

摘要：目的:构建能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的重组酿酒酵母。方法:利用降落-重叠延伸PCR法和一步等温法,将拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)、巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)以及粘红酵母的酪氨酸解氨酶基因(tal)分别构建含有不同抗性筛选标记的附加型酵母表达载体,采用Li Ac/SS carrier DNA/PEG法转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,通过高效液相色谱法检测重组酵母发酵产物。结果:成功获得酵母工程菌EC1118-H-TTC-K-T4C-TRC,以3 mmol/L酪氨酸为底物,28℃,150 r/min摇床避光发酵5 d,发酵液中白藜芦醇的产量为6.1979 mg/L。结论:成功构建一株能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的工业型重组酿酒酵母,为白藜芦醇的工业化生产进一步奠定了基础。

关键词：白藜芦醇;酿酒酵母;酪氨酸;生物合成;基因表达

基金资助：国家自然科学基金项目(No.31272217,31372116); 广东省科技计划项目(No.2013B010404041,2014B050505018)