单环刺螠内脏蛋白酶的分离纯化与酶学性质研究

来源：中国食品学报杂志2016年第6期北京时间：

作者：李倩倩; 刘双双; 陈海华; 王雨生; 秦福敏

单位：李倩倩; 刘双双; 陈海华; 王雨生; 秦福敏青岛农业大学食品科学与工程学院;青岛农业大学学报编辑部;,

摘要：以单环刺螠内脏为原料,对提取的蛋白酶的分离纯化条件及酶学性质进行研究。经硫酸铵纯化、Sephadex G-100凝胶过滤层析、DEAE-52阴离子交换层析得到单环刺螠内脏蛋白酶LPN2。SDS-PAGE电泳及高效液相色谱(HPLC)显示该酶纯度较高,分子质量约59 ku。其最适温度为50℃,最适p H范围6～8。丝氨酸蛋白酶抑制剂(PMSF)、金属蛋白酶抑制剂(EDTA)、Ca2+、Zn2+和Ba2+抑制蛋白酶LNP2的酶活,Fe2+在低浓度下对该酶有激活作用。根据水解度、风味感官分析、酶解前后游离氨基酸、分子质量分布结果,蛋白酶LPN2与中性蛋白酶作用方式相似,推断蛋白酶LPN2具有内肽酶的特性。

关键词：单环刺螠内脏;蛋白酶;分离纯化;酶学性质;酶切规律

基金资助：山东省高等学校优秀中青年骨干教师国际合作培养项目(SD20130825)