鼠李糖乳杆菌LS8基因组文库的构建

来源：中国食品学报杂志2016年第6期北京时间：

作者：辛红鸿; 张瑜; 刘景; 吕欣

单位：辛红鸿; 张瑜; 刘景; 吕欣西北农林科技大学食品科学与工程学院;,

摘要：为通过构建基因组文库方法,探究鼠李糖乳杆菌LS8菌株的细菌素编码基因,采用质粒消除方法证明LS8菌株细菌素编码基因位于基因组DNA。在此基础上,提取LS8菌株基因组DNA,采用同尾酶Sau3A1和Bam H1分别酶切基因组DNA,回收250～1 000 bp的片段,然后采用T4 DNA连接酶将回收片段与已酶切并去磷酸化后的载体(p Bluescript SK)进行连接,采用Ca Cl2处理法转化大肠杆菌(TOP10)。通过蓝白斑和氨苄抗性筛选,得到阳性克隆1 480个,采用菌液PCR对克隆进行检测。将测序并拼接后所得101条序列在NCBI上比对,发现5个可能的细菌素编码基因。分别设计引物对上述序列进行PCR扩增和测序,为细菌素基因的异源表达奠定基础。

关键词：鼠李糖乳杆菌LS8;基因组文库;细菌素

基金资助：国家自然科学基金—青年基金项目(31000819)