组氨酸标签蛋白纯化介质的合成及应用

来源：中国食品学报杂志2016年第10期北京时间：

作者：华伟伟; 徐维元; 黄建颖; 杨利军

单位：华伟伟; 徐维元; 黄建颖; 杨利军浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室;,

摘要：以离子液体为萃取溶剂,将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体,通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物;利用螯合的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对组氨酸标签特异的亲和性,对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,结果表明:AIL螯合金属离子后才会对FITC-(His)6-OH产生亲和性。Cu-AIL亲和性最强,对于His-tag EGFP的选择性最差;Ni-AIL受限于其低的金属离子结合量,获得的目的蛋白最少;Zn-AIL能有效亲和His-tag EGFP,纯化效率相对最佳。结合以上不同亲和介质的特性,开发出利用Zn-AIL与Cu-AIL的二次纯化体系,获得纯度约90%的His-tag EGFP。

关键词：亲和性离子液体;螯合;组氨酸标签;蛋白质纯化

基金资助：浙江省重大科技专项(2011C12031); 国家自然科学青年基金项目(21102129)