木糖还原酶基因整合表达载体构建

来源：中国食品学报杂志2016年第12期北京时间：

作者：葛菁萍; 杜仁鹏; 于新; 宋刚; 凌宏志; 平文祥

单位：葛菁萍; 杜仁鹏; 于新; 宋刚; 凌宏志; 平文祥微生物黑龙江省高校重点实验室黑龙江大学;,

摘要：木糖还原酶是酵母代谢木糖发酵的关键酶之一。根据已报道的木糖还原酶基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1 110 bp大小的片段。将木糖还原酶基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒p YX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行酶活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,酶活分别为6.513 U/mg和7.080 U/mg,是受体菌W5酶活的1.4倍(NADH)和1.3倍(NADPH),其酶活比为0.919。

关键词：休哈塔假丝酵母;木糖还原酶;重组酿酒酵母

基金资助：国家自然科学基金项目(31270143,31270534,31470537,31570492); 黑龙江省高等学校科技创新团队项目(农业微生物发酵技术)(2012td009)