鳕鱼皮胶原蛋白肽制备及其对肝细胞损伤的保护作用

来源：中国食品学报杂志2017年第8期北京时间：

作者：滕芳芳; 胡晓斐; 刘晨晨; 杨最素; 黄芳芳; 丁国芳

单位：滕芳芳; 胡晓斐; 刘晨晨; 杨最素; 黄芳芳; 丁国芳浙江海洋大学食品与医药学院浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心;浙江省舟山医院;浙江省海洋水产研究所;,

摘要：目的:研究鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺及不同浓度的鳕鱼皮胶原蛋白多肽对经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞的修复作用。方法:以料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度为因素,MTT试验所得细胞OD值为指标,通过正交试验探讨鳕鱼皮胶原蛋白肽的最佳酶解工艺,并经超滤、阴离子交换、分子层析对其纯化。通过试剂盒法检测该纯化肽作用Chang Liver细胞后,细胞内抗氧化酶和细胞上清液中转氨酶变化情况;采用Hoechst 33258染色法和Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术观察鳕鱼皮胶原蛋白肽作用损伤Chang Liver细胞后的细胞凋亡情况。结果:最优酶解条件:以胰蛋白酶为水解酶,酶解温度50℃,p H 6,加酶量2 000 U/g,酶解时间8 h,经纯化得到蛋白肽GM2-2-3;GM2-2-3作用经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞后,细胞氧化损伤明显减轻,细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性上升,MDA的含量下降,并呈剂量依赖性;细胞上清液中AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH活性有所下降,且呈剂量依赖性;与损伤组细胞相比,Chang Liver细胞形态较舒展,细胞染色质出现明显的聚集及边集化,细胞核皱缩现象减少,早期凋亡率降低,早期凋亡细胞变少。

关键词：鳕鱼皮;胶原蛋白肽;制备技术;辅肝

基金资助：国家自然科学基金面上项目(81273429); 浙江省科技厅重大专项(2013C03036,2011C02003,2011C23034); 舟山市科技计划项目(2012C23023)