同源片段长度对副干酪乳杆菌同源重组频率的影响

来源：中国食品学报杂志2017年第8期北京时间：

作者：李兴霖; 孙艳阳; 王洋; 由田; 葛菁萍; 平文祥

单位：李兴霖; 孙艳阳; 王洋; 由田; 葛菁萍; 平文祥黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室;农业微生物技术教育工程研究中心;,

摘要：目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系。方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prc K,prc R基因的4个同源重组质粒p2NIL-KA(625 bp,650bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp),并分别电转化于副干酪乳杆菌HD1.7感受态细胞中,检测筛选同源重组转化子,计算发生同源重组的频率。结果:成功构建同源重组质粒,p2NIL-KA(625 bp,650 bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp)同源重组频率分别为0,1.85%,0,1.78%。结论:当同源片段长度为1 350 bp或更长时,可与副干酪乳杆菌染色体进行同源重组。

关键词：副干酪乳杆菌;prcK;prcR;同源重组

基金资助：国家自然科学基金项目(31270143,31270534,31470537); 国家自然科学基金-青年科学基金项目(31300355); 黑龙江省高等学校科技创新团队项目(2012td009)