粘红酵母酪氨酸解氨酶基因的克隆表达与酶学性质

来源：中国食品学报杂志2017年第9期北京时间：

作者：梁景龙; 郭丽琼; 林俊芳; 叶志伟

单位：梁景龙; 郭丽琼; 林俊芳; 叶志伟华南农业大学食品生物技术研究所食品学院;,

摘要：为研究粘红酵母酪氨酸解氨酶(Rg TAL)的酶学性质,利用生物信息学分析方法对Rg TAL的氨基酸序列和蛋白结构进行分析;利用大肠杆菌BL21(DE3)和p ET-32a表达系统获得重组Rg TAL;用高效液相色谱(HPLC)检测酶的催化活性。结果:克隆获得完整的Rg TAL编码基因,氨基酸同源性分析发现,与已有的Rg TAL序列的同源性只有74%,序列具有活性结构区域位点Ala217、Ser218、Gly219和底物特异性决定位点His143。重组的Rg TAL最适反应温度40℃,最适合反应p H值5.0。对Rg TAL的动力学分析表明,催化底物L-酪氨酸的活力不高,有待进一步的研究。本文测定了重组Rg TAL的酶学性质,为今后利用Rg TAL生产香豆酸的和为进一步改造Rg TAL奠定了基础。

关键词：粘红酵母;酪氨酸解氨酶;对香豆酸

基金资助：国家自然科学基金项目(31272217,31071837); 广东省科技计划项目(2013B010404041)